Silica硅膠色譜柱的原理:
它的分離原理是根據(jù)物質(zhì)在硅膠上的吸附力不同而得到分離,一般情況下極性較大的物質(zhì)易被硅膠吸附,極性較弱的物質(zhì)不易被硅膠吸附,整個(gè)層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程。
Silica硅膠色譜柱的裝柱:
操作要點(diǎn):裝柱前柱底要墊一層脫脂棉以防吸附劑外漏。
有干法裝柱和濕法裝柱兩種方法
?。?)干法裝柱:將硅膠通過漏斗裝入柱內(nèi),中間不應(yīng)間斷,形成一細(xì)流慢慢加入管內(nèi)。也可用橡皮槌輕輕敲打柱硅膠柱使硅膠裝填連續(xù)均勻、緊密。柱裝好后,打開下端活塞,然后倒入洗脫劑洗脫以排盡柱內(nèi)空氣,并保持一定液面。
?。?)濕法裝柱:將超初準(zhǔn)備使用的洗脫劑裝入柱內(nèi),打開下端活塞,使洗脫劑緩慢流出。然后把硅膠慢慢連續(xù)不斷地倒入柱內(nèi)(或?qū)⒐枘z與適量洗脫劑調(diào)成混懸液慢慢加入柱內(nèi),),硅膠依靠重力和洗脫劑的帶動(dòng),在柱內(nèi)自由沉降,此間要不斷把流出的洗脫劑加回柱內(nèi)保持一定的液面,直至把硅膠加完并在柱內(nèi)沉降不再變動(dòng)為止。然后在硅膠上面加一小片濾紙或少許脫脂棉。根據(jù)加樣量控制洗脫劑液面至一定高度。
Silica硅膠色譜柱不使用時(shí)應(yīng)該怎樣保存?
如果色譜柱不使用,又該如何進(jìn)行保存呢?下列方法可供參考:
在柱二端包起來,放到盒子里室溫避光保存。毛細(xì)管柱可以用廢舊的隔墊裁成二塊,分別插在毛細(xì)管二段。填充柱用小塑料袋套住,再用細(xì)金屬絲扎起來。因?yàn)榉治鍪矣性S多化學(xué)試劑,特別在櫥內(nèi)會(huì)有些氣味,這樣能較好保管色譜柱。放置時(shí)也要有序放置,毛細(xì)管柱還是用盒子裝好以免壓壞,在放置時(shí)在柱上和記錄本上都做好記錄。
拆下后,兩頭用橡膠墊密封,橡膠墊原本色譜盒子就帶有,如果沒有,用進(jìn)樣墊制作一下就可以了,然后裝在原來的色譜盒子里面,備注上相應(yīng)的信息。通常要求放在干燥的地方,下次使用時(shí),切記進(jìn)樣端和出口端不能裝反。